Neue Application Note

Analyse von Ladungsspezies eines IgG4 mAbs mittels AEX-MS

Üblicherweise wird Kationenaustausch-Chromatographie (CEX) für die Charakterisierung der Ladungsheterogenität von monoklonalen Antikörpern (mAbs) mit einem hohen isoelektrischen Punkt (pI) verwendet. Mittlerweile sind immer mehr IgG4 basierte mAbs mit geringerem pI in der Entwicklung. Deshalb bietet Anionenaustausch-Chromatographie (AEX) einen alternativen Ansatz.

Diese Applikation zeigt die erfolgreiche Charakterisierung der Ladungsspezies eines IgG4 basierten mAbs mit einer starken Anionenaustausch-Säule, Bio Pro IEX QF, in Verbindung mit MS-Detektion.

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YMC Biochromatography Columns Katalog

Neue Technical Note

Analyse von nicht denaturierter und denaturierter siRNA mit AEX

siRNA wird üblicherweise mittels Ionenpaar-Umkehrphasen-Chromatographie (IP-RP) oder Anionenaustausch-Chromatographie (AEX) analysiert. Dabei erlauben unterschiedliche Bedingungen die Analyse der doppelsträngigen siRNA (nicht denaturiert) oder der Einzelstränge (denaturierende Bedingungen).

Diese Technical Note beschreibt die Methodenentwicklung für nicht denaturierte und denaturierte siRNA unter der Verwendung einer unporösen BioPro IEX QF Säule.

Verschiedene Methodenparameter werden betrachtet:

Einfluss von pH, Salzen und Temperatur
Organische Lösungsmittel
Additive der mobilen Phasen

Außerdem werden einige Methodenparameter für die Aufreinigung beschrieben. Lesen Sie die Technical Note für mehr Details.

Besuchen Sie unsere Homepage oder laden Sie die YMC Oligonucleotide Columns Broschüre herunter für weitere Informationen zu Oligonukleotid-Applikationen von YMC.

Abbildung: Analyse der siRNA-Duplex, Sense-Strang und Antisense-Strang mit optimalem Gradienten unter denaturierenden Bedingungen.

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Experten Tipp

Wie das Molekulargewicht von Nukleinsäuren berechnet wird

Die richtige Porengröße für SEC-Partikel bei der Oligonukleotidanalyse zu finden, kann eine echte Herausforderung sein. Typischerweise ist nur die Länge des Oligonukleotids gegeben. Allerdings wird die passende SEC-Stationärphase meist abhängig vom Molekulargewicht (M_r) ausgewählt.

Dieser Expertentipp enthält Formeln, um das M_rvon einzel- und doppelsträngiger DNA/RNA zu berechnen. Außerdem sind typische M_rvon poly(dT)-Oligonukleotiden und natürlich vorkommenden RNAs enthalten.

Die Formelsammlung erhalten Sie im Expertentipp unten.